El cambio de pH en cultivo de células El medio ambiente puede alterar prácticamente todos los procesos celulares como el metabolismo, el crecimiento celular. El pH extracelular es ligeramente alcalino y suele estar entre 7,3 y 7,4, mientras que el pH intracelular es ligeramente inferior a 7,2. Muchos orgánulos, como las mitocondrias, mantienen un pH ligeramente diferente del pH citoplasmático, pero si estas diferencias son demasiado grandes, existen consecuencias funcionales dramáticas para los orgánulos. Dado que el pH es uno de los parámetros más importantes del cultivo celular, los electrodos de pH son la clave para el control del pH en la fermentación.
Fermentador biorreactor Innova utiliza electrodos de pH importados de primera calidad para ofrecer un apoyo positivo en el control del pH: con una medición sin deriva, las señales de medición siempre se mantienen estables después de la esterilización con vapor, el autoclave y la limpieza CIP.
¿Qué debemos hacer antes de comenzar?
1. Confirme que no haya daños mecánicos en el vidrio de pH y el eje.
2. biorreactor Los electrodos de pH tienen un sello protector de silicona que cubre el diafragma cerámico; La cubierta del sello debe retirarse con la hoja adjunta.
3. Retire la tapa de hidratación y enjuáguela con agua destilada para asegurarse de que no haya cristales de electrolitos. el electrodo solo debe secarse con un paño después de enjuagar. No lo frote ya que esto puede acumular una carga estática y prolongar el tiempo de respuesta.
4. Confirme que no existen burbujas de aire detrás del vidrio de pH y elimine las burbujas de aire balanceando suavemente el electrodo en un plano vertical.
4. Consulte el manual de instrucciones para instalar el electrodo.
5. El electrodo se puede empapar en tampón ácido (pH4.00) durante varios minutos antes de usarlo, luego lave el bulbo de vidrio con agua pura, absorba suavemente el agua del bulbo de vidrio con papel absorbente y luego sumérjalo en tampón neutro (pH6. 86 o 7.00, etc.) durante varios minutos para activar el electrodo. Y luego inicie la calibración del electrodo de pH.
Cómo calibrar electrodos de pH en Fermentador de biorreactor?
1. Desenrosque la tapa del electrodo y conecte el cable del electrodo de pH del controlador. Gire lentamente para quitar la funda protectora de líquido y colóquela para evitar que se derrame el líquido protector.
2. Enjuagar la superficie del electrodo de pH con agua pura y secar el agua residual con papel absorbente y sumergirlo en la solución estándar de 7,00 (inmersión en el bulbo de vidrio). Cuando el valor de pH en el controlador sea estable, haga clic en "Calibración" en la pantalla.
3. Enjuague nuevamente la superficie del electrodo de pH con agua pura y seque el agua residual con papel absorbente. Luego, sumerja el electrodo de pH en la solución estándar de 4.00. cuando el valor de pH en el controlador sea estable, haga clic en "Calibración" en la pantalla.
4. El equipo calcula automáticamente el punto cero y la pendiente, el punto cero es aproximadamente 0,0 y la deriva positiva está en el rango de 0,5. cuando la pendiente es 1 y la deriva es ±0.2. Cuando el electrodo de pH esté calibrado, desconecte la línea de conexión entre el electrodo de pH y el controlador. Coloque con cuidado el electrodo de pH calibrado a un lado para evitar que se caiga y se rompa. Después de limpiar el fermentador, el electrodo de pH se instala en el puerto del electrodo de pH del fermentador. Si la pendiente no está en el rango normal, es necesario detectar si se debe a problemas del equipo, electrodo, envejecimiento de la línea o calibración.
Notas para la calibración de electrodos de pH:
1. Se debe utilizar una solución tampón nueva para la calibración. No lo use si la solución tampón caduca.
2. Coloque el electrodo en la solución tampón durante 1 minuto antes de la operación de seguimiento.
3. Después de enjuagar el electrodo, seque el agua con una toalla de papel suave y no frote la membrana sensible al pH.
4. El período de calibración del electrodo se determina de acuerdo con los diferentes entornos de uso y los requisitos de precisión, y el período de calibración apropiado se determina con la premisa de garantizar la precisión.
Cómo realizar el mantenimiento diario de biorreactor Electrodos de pH ?
1. Para contaminación general: lave el electrodo con agua, 0,1 mol/L de NaOH o 0,1 mol/L de HCl durante varios minutos.
2. Para grasa o contaminación orgánica: limpie el electrodo con acetona o etanol durante unos segundos.
3. Para la contaminación por sulfuro (ennegrecimiento del diafragma): trátelo con una solución de limpieza de diafragma (tiourea/HCl), sumerja la parte del bulbo de vidrio en la solución (el diafragma debe sumergirse en la solución) hasta que se vuelva incoloro (al menos 1 hora). ), luego sumerja en 3 mol/L KCI durante al menos 12 horas, enjuague completamente y vuelva a calibrar para su uso.
4. Para la contaminación por proteínas (amarilleo del diafragma): tratar con una solución de limpieza de electrodos (gastrina/HCl), la sección del bulbo de vidrio se colocó en la solución, asegurándose de que el diafragma estuvo sumergido en la solución (al menos 1 hora), luego se volvió a calibrar después de enjuagar con agua destilada.
5. Regeneración de electrodos: tratar con una solución de regeneración de electrodos. pero tenga en cuenta que la regeneración solo puede prolongar la vida útil del electrodo hasta cierto punto.
¿Cómo almacenar los electrodos de pH?
1. Cuando el electrodo no se utilice durante mucho tiempo, debe almacenarse en electrolito 3mol/L KCI o 9816/ViscolytTM.
2. El electrodo no se puede almacenar seco durante mucho tiempo y el electrodo no se puede almacenar con un medio seco adherido a la superficie. Si el electrodo se almacena seco por error durante varios días, debe sumergirse en electrolitos de almacenamiento normal durante varias horas antes de su uso.
3. El electrodo no se puede almacenar en agua destilada.
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